超凈工作臺在食用菌接種過程中的應(yīng)用

超凈工作臺在一般的實驗室項目都要使用到，就比如目前發(fā)展勢頭比較好的食用菌行業(yè)，對于超凈工作臺的使用更是非常有必要。

KLCFILTER通過業(yè)內(nèi)人士了解到，想要建設(shè)一座年產(chǎn)杏鮑茹150噸，白靈菇180噸，金針菇150噸的液體食用菌工廠所需要的儀器設(shè)備主要有液體發(fā)酵罐2臺、過濾罐1臺、臭氧滅菌機1臺、小型蒸氣鍋爐1臺、裝袋機1臺、攪拌機1臺、粉碎機1臺、滅菌鍋1個、高壓滅菌鍋1臺、接種通道1個、超凈工作臺1臺、顯微鏡1臺、酒精燈、燒杯和燒瓶（各種型號）若干。

超凈工作臺在食用菌的接種過程中起著舉足輕重的作用，接種步驟主要要分三步走：

一.接種前首先要準(zhǔn)備好滅菌備品：

1.取容積為2000ML（2升）的三角瓶，內(nèi)裝900ML水，蓋上棉塞，外包防潮牛皮紙；

2.將過濾器同聯(lián)結(jié)管（和罐體聯(lián)結(jié)端管口要塞上棉花，外包上牛皮紙防潮）用高壓消毒鍋滅菌，123℃，維持1小時。無菌水和過濾器，聯(lián)結(jié)管冷卻后待用。———注：此步驟要和培養(yǎng)基滅菌同步舉行；

3.當(dāng)罐內(nèi)壓力降至0.05mpa時，在火焰保護下接上過濾器聯(lián)結(jié)管；

4.開啟氣泵，打開進氣閥，當(dāng)罐溫降至26℃罐壓調(diào)節(jié)至0.05mpa時，舉行接種。

二.專用種瓶要嚴格的依照無菌操作程序進行：

這一操作應(yīng)在無菌的接種室或者接種箱的超凈工作臺上舉行。在操作過程中要嚴格的依照無菌操作程序舉行。

1.將外部用消毒液或75%的酒精擦試，取下種子瓶棉塞外的牛皮紙，但要保持原來的外形，放在超凈工作臺臺面上，在火焰保護下舉行無菌操作，將棉塞取下，用臺面上的牛皮紙將其包嚴。再取無菌接種鉤，將種子瓶內(nèi)的專用種搗碎，直至固體專用種松散、無結(jié)塊、細而均勻。

2.將搗碎的專用種在火焰保護下，倒進無菌水瓶中，并攪拌均勻。

3.加進抑菌劑，將抑菌劑的外表用消毒水或75%的酒精擦試；在火焰保護下無菌操作，將抑菌劑加進到無菌水瓶中（抑菌劑必需現(xiàn)用現(xiàn)加，不得延誤或者太提前）。

三.無菌環(huán)境下的接種

1.為了形成火焰保護下的無菌環(huán)境，要制備一個略大于進料口的火焰保護圈，在圈上的槽內(nèi)塞上脫脂棉花，并用95%酒精將其浸濕，備用。再備一條濕毛巾，放到壓力表上，待熄火用。

2.用消毒水或75%的酒精將進料口的外蓋和四面擦試1—2遍。

3.打開放氣閥，放氣完畢后點燃火圈將進料口封蓋擰下，但仍放在原位。

4.關(guān)閉放氣閥。將封蓋迅速取下，再在火焰的保護下，將三角瓶的瓶口瓶頸在火焰上灼燒片刻，然后將預(yù)備好的專用種倒進罐內(nèi)，并立馬上進料口封蓋擰緊，用濕毛巾將火圈熄滅。

5.再打開放氣閥將罐壓調(diào)整到0.03MPA。將罐內(nèi)溫渡調(diào)到26℃—28℃之間。不同的品種，發(fā)酵溫渡和時間略有不同。溫渡根據(jù)高暖和低溫品種的不同，在25—30℃之間選擇。時間根據(jù)菌種生長情況而定，一般每毫升1000個左右菌球即可（用肉眼瞧菌球在發(fā)酵液中約占1/3—1/2。

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